粉防已碱通过细胞内外途径诱导骨肉瘤U2-OS细胞和MG-63细胞凋亡的实验研究

【摘要】目的探究粉防已碱诱导骨肉瘤U2-OS细胞和MG-63细胞凋亡的机制和临床实用价值。材料和方法1.用MTT法测定粉防已碱抑制骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63的增殖情况。2.用电子显微镜观察粉防已碱诱导骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63凋亡的情况。3.用细胞流式法测定粉防已碱诱导骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63凋亡的情况。4.半胱天冬酶活性测定粉防已碱诱导骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63凋亡后caspase-3和caspase-8的活性。5.用westernblot分析粉防已碱诱导骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63凋亡后凋亡蛋白的变化。结果1.粉防已碱诱导骨肉瘤细胞凋亡具有剂量和时间依赖性,粉防已碱24h的IC50在骨肉瘤细胞MG-63和U2-OS分别为13.36μM和9.98μM。2.粉防已碱诱导骨肉瘤凋亡在电镜下显示细胞皱缩,核固缩,核碎裂,染色质凝聚和细胞质空泡,同时流式细胞仪也显示有细胞凋亡特征,半胱天冬酶活性测定显示caspase-3活性和caspase-8活性显著升高。3.westernblot分析显示促凋亡蛋白Bid和Bax显著提高,抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL显著下降,同时cytochrome-c和Apaf-1显著提高。结论1.粉防已碱诱导骨肉瘤凋亡具有剂量和时间依赖性。2.粉防已碱通过细胞内外途径诱导骨肉瘤U2-OS细胞和MG-63细胞凋亡。
【作者】陶利江；
【导师】陶惠民；
【作者基本信息】浙江大学，外科学，2014，硕士
【关键词】骨肉瘤；粉防己碱；凋亡；caspase；线粒体途径；

【参考文献】
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